1. Espressione e purificazione di proteine ricombinanti

NGF lab si occupa dello sviluppo e dell’ottimizzazione di protocolli per l’espressione di proteine ricombinanti: in particolare della produzione del Nerve Growth Factor (Fattore di Crescita Nervoso, NGF), del suo precursore proNGF, e delle sue forme mutanti con potenzialità terapeutiche, come NGF Painless, un candidato per la cura della malattia di Alzheimer e per il trattamento delle ulcere diabetiche e da decubito. NGF Lab produce inoltre numerosi anticorpi monoclonali altamente specifici, di esclusiva proprietà di EBRI, come ad esempio alcune scFv (single chain variable fragment) anti oligomeri Aβ, anticorpi monoclonali anti-NGF MAb αD11 e 4GA, anti-trkA MNAC13, anti frammento N-terminale di tau. In seguito alla pandemia da SARS-Cov2, NGF Lab si sta occupando della produzione, purificazione e caratterizzazione biochimica di scFv anti proteina N.

Attraverso specifiche analisi biochimiche e saggi biologici, ogni lotto di proteina o anticorpo ricombinante è controllato per verificarne la bioattività e appurare la consistenza tra i diversi lotti.

2. Immunoassay per la misura di biomarcatori e proteine nei fluidi biologici

NGF Lab si occupa dello sviluppo e della validazione di immunoassay per misurare nei fluidi biologici i livelli di biomarcatori o di proteine somministrate per fini terapeutici, avvalendosi di diverse tecnologie: ELISA, alphaLISA (Perkin Elmer), Simple WES (Protein Simple). La scelta tra le diverse tecnologie è valutata caso per caso, con il fine di ottenere il miglior saggio in termini di sensibilità, consistenza, specificità, riproducibilità. Finora, sono stati sviluppati e validati: 1) ELISA per valutare la farmacocinetica di proteine con fine terapeutico in modelli di topo e per testare gli anticorpi e le proteine prodotte dalla facility, 2) alphaLISA per misurare la farmacocinetica di NGF painless in siero umano e altri fluidi biologici. 

NGF LAB ha messo a punto un nuovo saggio immunologico per la misura di proNGF nel fluido cerebrospinale umano di pazienti Alzheimer e controlli, per la validazione di nuovi biomarcatori per la diagnosi precoce della malattia di Alzheimer e di altre malattie neurodegenerative.

Selected Publication

proNGF Measurement in Cerebrospinal Fluid Samples of a Large Cohort of Living Patients With Alzheimer’s Disease by a New Automated Immunoassay.Malerba F, Arisi I, Florio R, Zecca C, Dell’Abate MT, Bruni Ercole B, Camerini S, Casella M, Logroscino G, Cattaneo A. Front Aging Neurosci. 2021 Oct 27;13:741414. doi: 10.3389/fnagi.2021.741414. eCollection 2021. PMID: 34776928. PubMed

The chemokine CXCL12 mediates the anti-amyloidogenic action of painless human nerve growth factor. Capsoni S, Malerba F, Carucci NM, Rizzi C, Criscuolo C, Origlia N, Calvello M, Viegi A, Meli G, Cattaneo A. Brain. 2017 Jan;140(1):201-217. doi: 10.1093/brain/aww271. PubMed

Functional Characterization of Human ProNGF and NGF Mutants: Identification of NGF P61SR100E as a “Painless” Lead Investigational Candidate for Therapeutic Applications. Malerba F, Paoletti F, Bruni Ercole B, Materazzi S, Nassini R, Coppi E, Patacchini R, Capsoni S, Lamba D, Cattaneo A. PLoS One. 2015 Sep 15;10(9):e0136425. doi: 10.1371/journal.pone.0136425. eCollection 2015. PubMed